5981cc万洲国际外泌体RNA分离试剂盒采用酚/胍盐方法提取已分离的外泌体中总RNA(含有miRNA),可高效释放经超速离心、化学沉淀、免疫捕获或分子排阻法等不同方法所得外泌体中的RNA,通过核酸特异吸附柱可方便、快捷地纯化和洗脱外泌体RNA,所得外泌体RNA能够直接用于下游应用,如 RT-qPCR,Northern blot,芯片表达谱,NGS测序等。
该产品通过核酸特异吸附柱可方便、快捷地纯化和洗脱外泌体RNA。
| 组分编号 | 组分名称 | 41229ES30 | 41229ES50 | 保存条件 |
| 41229-A | 裂解液 A (Lysis buffer A) | 6 mL | 10 mL | RT |
| 41229-B | 裂解液 B(Lysis buffer B) | 6 mL | 10 mL | RT |
| 41229-C | 裂解液 C(Lysis buffer C) | 6 mL | 10 mL | RT |
| 41229-D | 洗涤液 W (Washing buffer W) | 30 mL | 50 mL | RT |
| 41229-E | 洗脱液 E (Elution buffer E) | 3 mL | 5 mL | 2-8℃ |
| 41229-F | 吸附柱(Spin Columns)/收集管(Collection Tubes 2.0mL) | 30套 | 50套 | RT |
| 41229-G | 1.5ml 离心管(Centrifuge Tubes 1.5 ml) | 30个 | 50个 | RT |
使用说明
1. 外泌体RNA释放
取200 μL分离的外泌体溶液,加入等体积(200 μL)的裂解液A,涡旋振荡30 sec,室温放置5 min,使外泌体充分裂解。
2. 外泌体RNA分离
加入200 μL裂解液B,盖好管盖,剧烈振荡15 sec,室温放置5 min。然后加入200 μL裂解液C,盖好管盖,剧烈振荡15 sec,室温放置5 min。4℃,12,000×g 离心 15 min,样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水相,RNA主要在水相中(上层),把水相转移到吸附柱中(避免吸取中间层),进行下一步操作。
3. 外泌体RNA洗涤
3.1 上清于吸附柱中静置5 min,4℃ 8,000×g 离心2 min,倒掉离心管中的液体。
3.2 取500 μL洗涤液W加入到纯化柱中,静置5 min后4℃ 8,000×g 离心2 min,倒掉离心管中的液体。
3.3 空柱4℃ 12,000×g 再离心2 min,去除残余液体,丢弃收集管,将吸附柱转入1.5 mL 离心管中(试剂盒提供)。打开吸附柱盖子,将吸附柱置于室温放置数分钟(5-10 min),以彻底晾干吸附材料中残余的洗涤液。
4. 外泌体RNA洗脱
向吸附柱中间位置悬空滴加50 μL洗脱液E,室温放置2-5 min,4℃ 12,000×g离心2 min,将溶液收集到离心管中。
冰袋运输,2-8℃保存(按照试剂盒成分分别保存),有效期1年。





